一般消化时间控制在 5 分钟以内,若出现消化过久问题,有可能胰酶保存不当已经失活。建议将大瓶胰酶分装后冻存;使用前最好 37℃水浴或培养箱回温;使用不含钙镁的缓冲液清洗细胞;依据不同细胞种类调整胰酶用量和消化时间及温度。
消化条件不稳定会导致黏附力低的细胞被消化下来并进入传代培养,黏附力强的细胞可能无法顺利被消化而丢失,造成人工筛选细胞的过程。因此,在摸索好合理的消化条件后,应保持恒定的胰酶用量、消化时间及温度,避免细胞被筛选。